Study of inhibitory effects by catechins in Japanese encephalitis virus (JEV) infection

兒茶素抑制日本腦炎病毒感染之研究

吳彰哲 a, 詹孟怡 a, 程景彥 a, 朱韻涵 a, 邱雅凰 a, 楊舒帆 a, 劉紹毅 b
a國立台灣海洋大學食品科學系
b台灣血液淨化基金會

日本腦炎(Japanese encephalitis, JE)是經由日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,

JEV)感染所產生的急性腦炎。病毒主要侵犯腦部，受損部位包括腦、脊髓和腦膜，倖存

者會有中樞神經系統受損之永久後遺症，目前並沒無有效的預防或治療藥物。兒茶素

(catechins)是從綠茶中萃取出的化合物。從已知文獻中得知兒茶素中的的EGCG具有抑制

病毒複製的功效。本論文主要使用綠恩生技提供的兒茶素錠探討兒茶素對日本腦炎病毒複製及發炎的抑制的效應，將有助於利用兒茶素當做抗病毒及抗發炎藥物或健康食品之應用。

本研究主要在in vitro的細胞培養上探討病毒感染與發炎的關係，以及小鼠感染日本

腦炎病毒的動物模式，並研究病毒與發炎細胞激素的蛋白質及基因在小鼠中樞神經系統

各區中分布之情形與日本腦炎症狀的相關性。更進一步探討兒茶素是否對於日本腦炎

病毒感染的細胞或小鼠具有保護作用。

In vitro(體外試驗)結果顯示兒茶素無論在綠猿猴腎細胞(Vero)或混合膠質細胞(mixed glia cell)都
具有明顯的抑制日本腦炎病毒複製的效應。兒茶素亦可抑制病毒感染mixed glia cell後iNOS基因的表現。

In vivo(生體試驗)結果顯示，C3H/HeN小鼠在感染病毒後第5天出現後肢癱瘓麻痺的情形，並於感染後第七天死亡。利用免疫墨點法 (dot blot)分析顯示感染病毒第 5天後的小鼠腦部可測得病毒外套膜蛋白的表現，比較小鼠中神經系統各區中病毒外套膜蛋白表現量後，發現病毒在大腦皮質感染最為嚴重。real-time PCR的結果也顯示病毒外套膜基因
亦在大腦皮質表現最強烈。餵食兒茶素之小鼠具有抑制日本腦炎病毒複製的效果。另外，real-time PCR及免疫墨點法的結果也顯示小鼠在感染日本腦炎病毒後大腦區域 iNOS及發
炎細胞激素會大量表現，而且餵食兒茶素後小鼠大腦區域中 iNOS、IL-6、TNF-α及 RANTES的表現情形上也能看到被抑制的效果產生。